Avaliação do efeito periférico da 15d-PGJ2 na artrite reumatoide induzida experimentalmente na articulação temporomandibular de ratos

Abstract

A Artrite Reumatoide (AR) é uma doença inflamatória crônica de caráter autoimune que resulta na destruição da cartilagem e ossos. A Articulação temporomanbidular (ATM) quando afetada pela AR pode produzir dor, rigidez articular, limitações de abertura e mordida aberta. Este estudo avaliou o efeito da administração periférica da 15d-PGJ2 no comportamento nociceptivo induzido experimentalmente pela AR na ATM de ratos, bem como seus mecanismos. Ratos Wistar foram imunizados através de injeções subcutâneas de 500 mg de mBSA diluídos em 0,2 ml de emulsão contendo 0,1 ml de fosfato salina (PBS) e 0,1 ml de Adjuvante Completo de Freund. Injeções de mBSA dissolvido em Adjuvante Incompleto de Freund foram dadas 7 e 14 dias após a primeira imunização. Ratos não imunizados receberam injeções semelhantes, mas sem o antígeno (mBSA). Vinte e um dias após a injeção inicial, a Artrite foi induzida nos animais imunizados através de uma injeção intra-articular de mBSA (1, 3 ou 10 μg/ATM). Ratos não imunizados e imunizados foram desafiados com o mBSA ou com PBS (controle). Os animais foram sacrificados 6, 12, 24 ou 48 horas após a injeção intra-articular do mBSA seguida (15 min) pela injeção de uma dose sublimiar de formalina (0,5%) na ATM. Um conjunto diferente de animais imunizados foram desafiados com mBSA (seguido de injeção com 0,5% de formalina) e receberam diferentes doses de 15d-PGJ2 (30, 100 ou 300 ng/ATM). A hipernocicepção foi avaliada medindo as respostas comportamentais nociceptivas, como coçar a região orofacial e levantar a cabeça. Depois dos experimentos comportamentais, os animais foram anestesiados e tecidos periarticulares foram retirados e homogeneizados. Os sobrenadantes foram utilizados para avaliar os níveis de TNFα, IL-1β e KC por ELISA e também para avaliar a expressão de PKC e PKA por análise de Western Blot. Todos os procedimentos experimentais em animais e os protocolos foram aprovados pelo Comitê em Pesquisa Animal da Universidade de Uberaba (059/2009). A injeção intra-articular do mBSA, mas não PBS, induziu respostas comportamentais nocioceptivas em ratos imunizados. O pico destas respostas foram obtidas utilizando 10 µg/ATM de mBSA após 24h. O pré-tratamento (15min) com 15d-PGJ2 (30, 100 e 300 ng/ATM) inibiu a hipernocicepção induzida pela AR na ATM de uma maneira dose-dependente (47%, 51% e 65%

respectivamente, Tukey p<0,05). Nenhuma das três doses utilizadas reduziu a expressão de TNF-α e IL-1β, mas reduziram a quantidade de KC (72%, 74% e 57% respectivamente, p<0,05). Análises através do Western Blot demonstrou que o uso de 100 ng/ATM da 15d-PGJ2 na ATM com AR induzida foi capaz de reduzir a expressão de PKA (67%, p<0,05), assim como a expressão de PKC (42%, p<0,05) . No presente estudo, demonstramos que a 15d-PGJ2 foi capaz de reduzir o comportamento nocioceptivo da AR induzida na ATM. Este efeito antinociceptivo está relacionado, em parte, devido à diminuição dos níveis de KC, da expressão da PKA e da PKC na ATM.